La microtomografía de rayos X ha surgido como un nuevo método para descifrar la citoarquitectura y la conectividad del cerebro, y aquí presentamos un método para obtener imágenes de neuronas enteras.
La microtomografía de rayos X de alta resolución basada en el sincrotrón como herramienta para desvelar la arquitectura neuronal tridimensional del cerebro
En 'High-resolution synchrotron-based X-ray microtomography as a tool to unveil the three-dimensional neuronal architecture of the brain', Matheus de Castro Fonseca et al. (2018) señalaron que el estudio de las neuronas como unidades individualizadas tiene su inicio en el siglo XIX con la creación de la Doctrina de la Neurona.
En los últimos años se han realizado grandes esfuerzos para comprender la organización y la conectividad neuronal en muestras cerebrales intactas. La técnica de etiquetado de Golgi-Cox ofrece un contraste adecuado para el etiquetado específico de las neuronas para la microtomografía de rayos X.
Las neuronas tienen una morfología distinta y patrones específicos de conectividad, que son esenciales para su correcto funcionamiento. Los investigadores presentan un método de obtención de imágenes que combina la microtomografía de rayos X basada en el sincrotrón con el protocolo de impregnación de Golgi-Cox.
El método ofrece un contraste mayor y más homogéneo de las neuronas enteras distribuidas de forma relativamente dispersa en el tejido.
Los cerebros se incubaron en la solución de tinción de Golgi-Cox durante 14 días, protegidos de la luz. Tras el periodo de incubación, los cerebros se seccionaron en serie utilizando un vibratomo.
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Resumen gráfico con tecnología Mind the Graph
El autor utilizó Mind the Graph para crear una ilustración esquemática que represente a un ratón adulto al que se le inyecta i.p. una solución salina o pilocarpina (280 mg/kg). Representar procesos complejos con infografías es una buena manera de hacerlos fácilmente comprensibles, sin dejar de lado los detalles y la información crucial.
Algunos de los resultados de los investigadores parecen consolidar lo que se sabía anteriormente sobre esta área: "La impregnación neuronal a base de mercurio mostrada aquí, nos permitió definir claramente neuronas enteras principalmente por una impregnación más continua y homogénea de las células y una densidad mucho menor de artefactos", sugirió de Castro Fonseca.
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