{"id":11803,"date":"2020-10-28T09:30:35","date_gmt":"2020-10-28T11:30:35","guid":{"rendered":"https:\/\/mindthegraph.com\/blog\/?p=11803"},"modified":"2022-10-18T08:09:32","modified_gmt":"2022-10-18T11:09:32","slug":"rt-pcr-test-for-coronavirus","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/mindthegraph.com\/blog\/de\/rt-pcr-test-fur-coronavirus\/","title":{"rendered":"Der RT-PCR-Test f\u00fcr Coronaviren"},"content":{"rendered":"

Von vielen Dingen, die Sie \u00fcber COVID-19 im Jahr 2020 geh\u00f6rt haben, ist eines mittendrin: der Test, der verwendet wird, um festzustellen, ob jemand mit dem Virus infiziert ist, der ber\u00fchmte RT-PCR-Test oder nur PCR.<\/span><\/p>\n

Sicherlich haben Sie schon einmal von diesem Test geh\u00f6rt, von einem Arzt oder in den Nachrichten. Der PCR-Test wird eingesetzt, um das Vorhandensein (oder Nichtvorhandensein) des Virus im K\u00f6rper einer Person festzustellen.<\/span><\/p>\n

Der RT-PCR-Test ist nicht der einzige Test, der das Virus nachweisen kann, aber im Vergleich zu den anderen Methoden ist er der genaueste und zuverl\u00e4ssigste. Ein weiterer Test ist der herk\u00f6mmliche Serologietest, der spezifische Antik\u00f6rper in Blutproben nachweist.<\/span><\/p>\n

Die Buchstaben in RT-PCR, stehen f\u00fcr <\/span>Reverse Transkription Polymerase-Kettenreaktion<\/b>Sie wird seit Jahrzehnten von Wissenschaftlern verwendet, um mehrere Kopien von genetischem Material herzustellen.<\/span><\/p>\n

Mit anderen Worten, in diesem Fall mehr genetisches Material von SARS-CoV-2, das als Fingerabdruck verwendet wird, um das Vorhandensein des Virus in Proben aus der Nase, den Ohren oder dem Speichel von Patienten nachzuweisen. Wenn in der Probe Viren versteckt sind, und sei es auch nur in geringen Mengen, kann der Test aufgrund seines Copy-Paste-Zyklus das Virus nachweisen. Aus diesem Grund ist der RT-PCR-Test so zuverl\u00e4ssig.<\/span><\/p>\n

Der Test<\/b> ist eine Methode mit im Wesentlichen zwei Schritten innerhalb des Temperaturzyklus, bei der ein St\u00fcck genetisches Material, sei es DNA oder RNA, kopiert und eingef\u00fcgt wird.<\/span><\/p>\n

Der Test erfordert eine <\/span>Thermocycler-Maschine<\/b> die eine genaue <\/span>Temperatur- und Zeitsteuerung<\/b>. Durch mehrere Temperaturzyklen vergr\u00f6\u00dfert sich das genetische Material des Virus. Im Folgenden wird ein Beispiel f\u00fcr einen Temperaturzyklus gezeigt.<\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

Die Methode erfordert zwei Hauptenzyme, die Reverse Transkriptase (daher das \"RT\" im Titel) und die DNA-Polymerase. Jedes von ihnen hat eine Wirkungsphase und eine Funktion. In der Abbildung oben ist die gelbe Phase des Zyklus die Phase, in der die RT wirkt, und die rote Phase ist die Phase, in der die DNA-Polymerase ihre Aufgabe erf\u00fcllt.<\/span><\/p>\n

Das erste Enzym stellt den komplement\u00e4ren DNA-Strang aus dem RNA-Virus her, so dass das zweite Enzym die Arbeit des Kopierens und Einf\u00fcgens des neuen, gerade hergestellten DNA-Strangs \u00fcbernehmen kann, wodurch sich die Menge des vorhandenen genetischen Materials erh\u00f6ht. Diese Amplifikation erm\u00f6glicht es, das genetische Material zu charakterisieren und\/oder zu manipulieren, was in einer kleineren Menge nicht m\u00f6glich w\u00e4re.<\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

F\u00fcr all diese Vorg\u00e4nge ben\u00f6tigen die Enzyme die Hilfe eines kleinen (oder gro\u00dfen) Molek\u00fcls namens PRIMER. Die Funktion des Primers besteht darin, die Stelle zu markieren, an der das Enzym mit der Verl\u00e4ngerung der Str\u00e4nge beginnen soll; ohne ihn kann der Kopiervorgang der DNA-Polymerase nicht beginnen.<\/span><\/p>\n

Der Primer kann mit einer zuf\u00e4lligen oder einer spezifischen Form gew\u00e4hlt werden. In solchen F\u00e4llen ist es sehr wichtig, die genetische Karte des Virus zu kennen, damit spezifische Primer verwendet werden k\u00f6nnen, um die Effizienz und Zuverl\u00e4ssigkeit der Ergebnisse zu erh\u00f6hen.<\/span><\/p>\n

Wenn Sie wie wir neugierig sind und mehr \u00fcber die RT-PCR erfahren m\u00f6chten, k\u00f6nnen Sie weitere Einzelheiten nachlesen\u00a0<\/span> dieser wissenschaftliche Artikel <\/span>genau hier<\/span><\/a>\u00a0 aber im Wesentlichen sind hier alle Informationen, die f\u00fcr den Test erforderlich sind:<\/span><\/p>\n

Das genetische Material des Virus, die RNA<\/strong><\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

Reverse Transkriptase und DNA-Polymerase-Enzyme<\/b><\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

PRIMERS<\/b><\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

Nukleosid-Triphosphate<\/b><\/span><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

Und fluoreszierende Reporterfarbstoffe:\u00a0<\/b><\/span><\/p>\n

Um festzustellen, ob eine Probe mit dem COVID-19-Virus kontaminiert ist oder nicht, wird der Test mit fluoreszierenden Reporterfarbstoffen in Kombination mit dem RT-PCR-Test durchgef\u00fchrt. Der Test basiert auf dem Vorhandensein oder Nichtvorhandensein eines Fluoreszenzsignals in einer Probe. Bleibt das Signal aus, kann der Test als negativ oder falsch-negativ gewertet werden. Bei Vorhandensein eines intensiven Signals kann nicht nur auf das Vorhandensein von Virosen, sondern auch auf ein fortgeschrittenes Krankheitsstadium geschlossen werden.<\/span><\/p>\n

Mischen Sie alle Zutaten und geben Sie sie in die Thermocycler-Maschine.\u00a0<\/b><\/span><\/p>\n

Der erste Schritt des Tests ist in der folgenden Infografik dargestellt. Das RT-Enzym erstellt die erste Kopie des genetischen Materials des in der Probe vorhandenen Virus. Nachfolgend sehen Sie den zweiten Schritt der RT-PCR-Methode. Der Primer gibt die Startposition an und die DNA-Polymerase beginnt durch eine enzymatische Reaktion mit der Verl\u00e4ngerung der DNA-Str\u00e4nge.<\/span><\/p>\n

\"Der<\/a><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

Bei diesem Bild handelt es sich um eine elektronenmikroskopische Aufnahme des SARS-CoV-2-Virus, und man kann die Struktur des Virus genau erkennen. Ist das nicht sch\u00f6n?\u00a0\u00a0<\/span><\/p>\n

Der Test ist komplex und nicht so einfach, wie es scheint, aber ich wette, dass es mit den Infografiken viel einfacher war, das Gesamtbild zu verstehen, wie es funktioniert, oder?<\/span><\/p>\n

Sie k\u00f6nnen dies mit jeder wissenschaftlichen Information tun, die Sie wollen, indem Sie\u00a0<\/span> Mind the Graph<\/span><\/a>. Die Plattform ist dazu da, um Ihnen die M\u00f6glichkeit zu geben, wissenschaftliche Informationen besser zu vermitteln. Erfahren Sie mehr \u00fcber die Nutzung der Plattform und wenn Sie Hilfe ben\u00f6tigen, kontaktieren Sie uns bitte<\/span>!<\/b><\/p>\n

Referenz<\/b><\/p>\n

AI, T. et al. Correlation of Chest CT and RT-PCR Testing for Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) in China: A Report of 1014 Cases. Radiology, v. 296, n. 2, p. E32-E40, 26 fev. 2020.<\/span><\/p>\n

GIBELLINI, D. et al. Quantitativer Nachweis der Viruslast des Humanen Immundefizienz-Virus Typ 1 (HIV-1) mittels SYBR-gr\u00fcner Echtzeit-RT-PCR-Technik bei seropositiven HIV-1-Patienten. Journal of Virological Methods, v. 115, n. 2, p. 183-189, 1 fev. 2004.<\/span><\/p>\n

JAMES, D. A simple and reliable protocol for the detection of apple stem grooving virus by RT-PCR and in a multiplex PCR assay. Journal of Virological Methods, v. 83, n. 1, p. 1-9, 1 dez. 1999.<\/span><\/p>\n

LI, Y. et al. Stability issues of RT-PCR testing of SARS-CoV-2 for hospitalized patients clinically diagnosed with COVID-19. Journal of Medical Virology, v. 92, n. 7, p. 903-908, 2020.<\/span><\/p>\n

LIAO, C.-S. et al. Miniatur-RT-PCR-System f\u00fcr die Diagnose von Viren auf RNA-Basis. Nucleic Acids Research, v. 33, n. 18, p. e156-e156, 1 out. 2005.<\/span><\/p>\n

MOHAN, A. et al. Prevalence of viral infection detected by PCR and RT-PCR in patients with acute exacerbation of COPD: A systematic review. Respirology, v. 15, n. 3, S. 536-542, 2010.<\/span><\/p>\n

NOLAN, T.; HANDS, R. E.; BUSTIN, S. A. Quantifizierung von mRNA mittels RT-PCR in Echtzeit. Nature Protocols, v. 1, n. 3, p. 1559-1582, vor. 2006.<\/span><\/p>\n

Neuartiges Coronavirus SARS-CoV-2 | Diese Transmissionselektronenaufnahme | Flickr. Dispon\u00edvel em: . Acesso em: 23 jul. 2020. <\/span><\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":4,"featured_media":11847,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":[],"categories":[959,28],"tags":[388,799,554,798,250],"yoast_head":"\nThe RT-PCR Test for Coronavirus - Mind the Graph Blog<\/title>\n<meta name=\"description\" content=\"Read this blog to know everything related to the popular COVID-19 test, RT-PCR or only PCR. 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